定位诱变产生的DNA聚合酶β某些特性的改变

摘要

作者对定位诱变克隆的大鼠DNA聚合酶β(pol β)基因产物的酶学特性作了初步研究。结果表明Gln代替Arg^(182)(RQ 182)或Arg^(183)(RQ 183)后,变异的酶对单链模板DNA的结合增强。RQ 182对底物dTTP和引物Oligo(dT)的Km值与野生型pol β相似,但RQ 183对底物的Km值较野生型pol β增加了3倍,对引物的Km值也显著增加,表明RQ 183对底物和引物的亲和力明显下降。推测Arg^(182)和Arg^(183)参与pol β的活性中心功能,并与酶和模板DNA结合,对引物的识别以及与底物的结合和催化有关。