妊娠相关血浆蛋白-A单克隆抗体的制备和初步鉴定

摘要

目的制备娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)单克隆抗体(M cAb)。方法利用PAPP-A抗原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,间接ELISA方法对细胞培养上清检测、筛选,建立分泌PAPP-A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,扩人培养后,Balb/c小鼠腹腔注射杂交瘤细胞株,产生腹水后,对腹水进行收集、纯化、签定。结果筛选出稳定分泌PAPP-A M cAb的杂交瘤细胞株,W estern-b lot分析证实M cAb与PAPP-A有较高的特异性及敏感性。结论本实验成功制备了抗PAPP-A特异性的M cAb,可用于PAPP-A免疫检测方法的建立。