人类GSTP1基因最小启动子的克隆及其转录活性研究

摘要

目的 :克隆编码谷胱甘肽S 转移酶P1(GSTP1)基因的最小启动子并研究它在上皮性卵巢癌细胞中的转录活性。方法 :以人类基因组为模板扩增人类GSTP1基因的最小启动子 ,将启动子分别插入到pGEM T载体和荧光素酶报告基因pGL3 enhancer载体中。将重组荧光素酶报告基因系统分别转染顺铂耐药AD6和顺铂敏感A2 780细胞 ,比较启动子在两种细胞中的活性 ;同时将转染后的AD6细胞用H2 O2 处理 ,观察细胞氧化还原状态的变化对启动子活性的影响。结果 :报告基因活性测定结果表明 ,GSTP1在耐药AD6细胞中启动子表现出比在A2 780细胞中强的活性 ,在AD6细胞中启动子活性经H2 O2 诱导后增高。结论 :成功克隆了GSTP1最小启动子 ,在AD6细胞中GSTP1启动子的功能活性较强 ,为下一步对多药耐药性卵巢癌进行靶向基因治疗提供了重要依据。