RNA干扰MDM2下调人乳腺癌细胞中VEGF的合成并抑制肿瘤血管的生成

摘要

目的探讨小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)抑制人乳腺癌细胞中鼠双微粒体2(murine double minute 2,MDM2)的表达对癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)合成以及裸鼠移植瘤组织内血管生成的影响。方法根据MDM2已知的c DNA序列设计并转录合成特异性si RNA,转染高表达MDM2的人乳腺癌MDA-MB-468细胞,低氧培养后应用蛋白质印迹法和ELISA法检测肿瘤细胞及其上清液中VEGF的水平。构建裸鼠乳腺癌移植瘤模型,观察MDM2沉默后肿瘤生长情况,蛋白质印迹法、免疫组织化学及ELISA方法检测荷瘤组织和裸鼠血清标本中的VEGF含量,并以CD34标记血管内皮细胞计数微血管密度(microvessel density,MVD)。结果si RNA抑制MDM2表达后,MDA-MB-468细胞分泌的VEGF蛋白显著减少(P=0.006)。裸鼠移植瘤模型显示,封闭MDM2表达使荷瘤组织生长变慢(P=0.008),且荷瘤小鼠血清VEGF水平明显减低(P=0.008),荷瘤组织内MVD也明显降低(P=0.003)。结论 MDM2 si RNA能有效减低乳腺癌细胞中VEGF的合成,并抑制裸鼠移植瘤组织内新生血管的生成,为MDM2/VEGF途径抗肿瘤血管生成作用的研究及靶向药物开发提供了新的思路。