多重半套式PCR检测细菌16srRNA基因方法的建立

摘要

①目的　设计并建立多重半套式聚合酶链反应 (PCR)快速检测临床标本中感染病原菌DNA方法。②方法　通过对多数病原菌 16srRNA基因保守区和变异区序列分析 ,设计通用引物和革兰阴性菌及革兰阳性菌的特异性引物分别作为外侧和内侧引物 ,分两步先后加入同一反应体系中对不同细菌的DNA进行扩增。③结果金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌经扩增后均有长度为 10 32bp的DNA片段产生 ;金黄色葡萄球菌另有一长度为336bp的特异性产物 ,大肠埃希菌另有一长度为 12 7bp的特异性产物。 ④结论　该方法可以特异、敏感、快速检测出临床感染的病原菌。