目的:建立一种敏感性高、特异性强的检测肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.hepaticus)的套式PCR方法并对其临床应用进行探讨.方法:本研究基于9种H.hepaticus亚种的16S rRNA基因设计筛选出1套套式引物(2条内引物、2条外引物),优化反应条件后,通过模拟粪便和胆汁标本、相关细菌、动物模型标本和临床标本的检测对该套式PCR方法的敏感性、特异性进行评估.结果:在模拟粪便和胆汁标本中,该方法检测H.hepaticus的最低检出浓度达到102C F U/m L.幽门螺杆菌、胆螺杆菌、空肠弯曲菌、大肠埃希菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌检测结果均为阴性.本研究建立了3例感染肝螺杆菌的SPF级Balb/c小鼠模型.该方法在3例模型的粪便和盲肠标本及2例模型的肝脏标本中检测出H.hepaticus.10例胆石病患者中,该法在2例患者的胆囊胆汁、胆囊黏膜和粪便标本中检测出有H.hepaticus临床标本的检测中,PCR检测方法、医疗干预和标本的类型及处理可能都会影响检测的结果.结论:本研究建立的套式P C R方法,敏感性高、特异性强,可以用于小鼠和人的H.hepaticus感染.H.hepaticus感染可能和人胆石病有关.PCR检测方法、医疗干预和标本的类型及处理可能都会影响临床标本的检测结果.
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