牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法

摘要

本发明牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法涉及基因工程技术。根据布氏杆菌16S rRNA基因序列，设计合成套式PCR的外向引物和内向引物；用优化CTAB-NaCl法提取牛奶样品细菌染色体DNA，以外向引物和内向引物进行二次PCR扩增，凝胶电泳检查PCR产物，建立牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法。该方法可直接从牛奶样品中检出污染布氏杆菌，对牛奶样品中布氏杆菌的检测下限达3.3CFU/mL，与大肠杆菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和螺旋杆菌等细菌不存在非特异扩增，具有特异性强、敏感性高和实用性强等优点，可为奶牛布氏杆菌病普查和监测，以及牛奶制品食品安全监控提供新的技术手段。