白藜芦醇对TGF-β_1诱导的肾小球足细胞转分化抑制作用研究

摘要

目的研究白藜芦醇(Resveratrol)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的肾小球足细胞转分化的影响。方法体外分化条件下培养小鼠足细胞10天,分为正常组、模型组和白藜芦醇高、低剂量组。白藜芦醇高、低剂量组分别用5、2μmol/L白藜芦醇干预30 min后,模型组和干预组各用5 ng/mL TGF-β1继续诱导72 h,正常组常规培养。分别采用免疫细胞化学、流式细胞术、Western blot技术等检测足细胞表型蛋白分子上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、胎盘钙黏蛋白(P-cadherin)、紧密连接蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)、肾小球足细胞相关蛋白1(NEPH1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。用蛋白滤过试验检测单层足细胞的蛋白滤过功能。结果与正常组比较,模型组E-cadherin+细胞百分率、P-cadherin、ZO-1、NEPH1蛋白表达及蛋白浓度均显著降低(P<0.05),α-SMA蛋白表达升高(P<0.05),透过单层足细胞的蛋白浓度显著增高(P<0.05)。与模型组比较,白藜芦醇高、低剂量组E-cadherin+细胞百分率均升高(P<0.05),透过单层足细胞的蛋白浓度均降低(P<0.05);白藜芦醇低剂量组Pcadherin及NEPH1蛋白表达均升高(P<0.05);白藜芦醇高剂量组P-cadherin、ZO-1及NEPH1蛋白表达均升高,α-SMA蛋白表达降低(P<0.05)。白藜芦醇浓度与E-cadherin+、P-cadherin及NEPH1蛋白表达水平呈显著正相关(r E-cadherin+=0.772,r P-cadherin=0.756,r NEPH1=0.809,P<0.05)。结论白藜芦醇显著抑制TGF-β1诱导的足细胞表型异常可能是其维持肾小球滤过屏障的完整性,降低蛋白尿的重要机制。