桃叶片β-半乳糖苷酶基因全长cDNA克隆及原核表达

摘要

利用RT-PCR和RACE技术,从蟠桃(Amygdaluspersicavar.compressaBean)中克隆出3285bp的β-半乳糖苷酶基因cDNA全长,GenBank登录号为AY874412。该cDNA2559bp,编码853个氨基酸。将其插入到大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,转化BL21trxB(DE3),筛选重组菌株。经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE呈现约115kDa特异表达条带。并通过体外酶促反应分析表达的融合蛋白的生物活性。