EDNRB基因启动子甲基化状态在胃癌KATOⅢ细胞系中的检测

摘要

目的:探讨胃癌KATOⅢ细胞系内皮素受体B(EDNRB)基因启动子甲基化状态及mRNA表达在临床中的应用.方法:提取正常健康人外周血和胃癌KATOⅢ细胞系总DNA和总RNA,分别进行亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)和逆转录PCR(reverse transcriptase PCR,RT-PCR)扩增,以正常健康人外周血为对照,比较EDNRB基因启动子甲基化状态和mRNA表达差异.结果:胃癌KATOⅢ细胞系1-9、14和15等CG位点表现为无甲基化或低甲基化状态(≤20%),其余位点表现高甲基化状态(≥50%),正常健康人外周血EDNRB基因启动子除第22个CG甲基化率为10%外,其余位点均表现为无甲基化状态,胃癌KATOⅢ细胞系甲基化发生率显著高于健康人外周血,且其mRNA表达明显受到抑制.结论:EDNRB基因启动子甲基化在胃癌发病机制中扮演重要角色.