雌激素对人子宫内膜样癌细胞中P57kip2表达及形态变化影响的研究

摘要

目的 研究雌激素(Estrogen,E)对人子宫内膜样癌(Endometrioid carcinoma,EC)Ishikawa细胞(高分化)和JEC细胞(中分化)中P57kip2蛋白表达及细胞形态变化的影响.方法 用等量含低、中、高浓度雌二醇(β-Estradiol,E2)(10-6、10-8、10-10 mol/L)的培养基干预Ishikawa和JEC细胞作为实验组,等量不含E2的完全培养基培养作为对照组.细胞培养24、48、72 h后,MTT法检测细胞增殖情况;培养24、72 h后,Western blot法检测P57 kip2蛋白表达情况,光镜、电镜观察细胞形态变化.结果 ①MTT结果:与对照组比较,在Ishikawa细胞中,E2低、中浓度组增殖明显(P<0.05),高浓度E2组细胞增殖不明显(P>0.05);在JEC细胞中,E2各浓度组均随药物浓度增高,促细胞生长的作用更明显(P<0.05).②形态结构:与对照组比较,在低、中浓度组生长密度均增大,但低浓度组部分细胞内线粒体、内质网肿胀较轻微,中浓度组Ishikawa细胞部分线粒体肿胀较明显,JEC细胞损伤加重,可见核袋、核孔.高浓度组Ishikawa细胞生长密度减少,可见线粒体肿胀、内质网扩张囊泡化更明显,可见凋亡小体;JEC细胞生长密度则持续增大,线粒体高度肿胀并出现絮状沉积物,核内染色质均匀化,核孔增多.两株EC细胞核质比均较对照组增大.③Western blot结果:随着E2作用时间延长、作用浓度增加,P57kip2蛋白在Ishikawa细胞中表达逐渐增加,在JEC细胞中表达逐渐降低(P<0.05).结论 随着E浓度增加,P57kip2蛋白在Ishikawa细胞中表达呈递增趋势,发挥其抑制细胞生长的作用;P57 kip2蛋白在JEC细胞中表达呈递减趋势,使其负向调控细胞周期的能力减弱,致细胞增殖明显;较高浓度则使EC细胞水肿明显、结构破坏,甚至造成不可逆性损伤,还可能诱导EC细胞往分化更差的方向发展.