Ishikawa细胞

摘要： 目的探究白藜芦醇促进子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬的作用机制。方法Ishikawa细胞分为对照组、白藜芦醇组和白藜芦醇+PI3K激动剂(740Y-P)组。用qRT-PCR和Western blot法检测LC3、Beclin1、PI3K和AKT的表达水平,用细胞免疫荧光法检测LC3的表达强度,用电镜观察细胞的自噬情况。结果白藜芦醇可增加细胞的Beclin1和LC3 mRNA(P<0.05,P<0.01)及蛋白水平(均P<0.01);细胞质LC3红色荧光强度增强;自噬小体数量增加。白藜芦醇组Ishikawa细胞P-PI3K(P=0.017)和P-AKT(P=0.025)蛋白水平低于对照组,而白藜芦醇+740Y-P组自噬水平相对于白藜芦醇组有所下降(P<0.01)。结论白藜芦醇可能是通过抑制PI3K/AKT通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬,从而抑制细胞增殖。白藜芦醇可能成为子宫内膜癌辅助治疗的新药物。

摘要： 目的:探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制。方法:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平,NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平。荧光素酶报告检测RelA启动子活性。高通量测序检测孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miRNA表达差异。过表达孕酮和骨化三醇共同调控的差异miRNA,检测RelA表达。结果:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后,细胞因子IL1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2分泌水平和表达均显著降低(P0.05),但RelA mRNA水平降低(P0.05)。结论:孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miR-590-5p表达升高,miR-590-5p靶向NF-κB亚基RelA-3'端非编码区,降低RelA蛋白水平,降低NF-κB复合体活性,最终下调细胞因子IL1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达。本研究为孕酮和骨化三醇治疗子宫内膜癌的分子机制提供新依据,为孕酮和骨化三醇降低机体炎症反应提供理论依据。

摘要： 目的利用活细胞工作站观察巨噬细胞吞噬子宫内膜癌细胞的过程及流式细胞术检测巨噬细胞吞噬肿瘤细胞对T细胞的活化。方法将Ishikawa细胞与THP-1诱导的巨噬细胞分别用CFSE荧光探针和CD11b标记,混合接种于成像皿,实时记录120 min内巨噬细胞对Ishikawa细胞的吞噬,流式细胞术检测巨噬细胞与Ishikawa细胞共培养后对T细胞活化的影响。结果共培养的2种细胞相互接触后Ishikawa细胞的绿色荧光被巨噬细胞摄取,且巨噬细胞能连续吞噬多个Ishikawa细胞。吞噬了Ishikawa细胞的巨噬细胞能诱导细胞毒性T细胞分化。结论成功利用活细胞工作站构建巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的体外模型,为检测巨噬细胞及T细胞对肿瘤细胞双重杀伤作用提供可行的实验方法。

摘要： 目的:探讨大蒜素诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的作用机制.方法:分别以二甲基亚砜(空白对照组)、大蒜素(12.5、25、50μg/mL)和LY2940025μg/mL干预对数生长期Ishikawa细胞.48 h后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡状况,Western Blotting法检测p-PI3K、p-AKT、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:与空白对照组比较,经大蒜素12.5、25、50μg/mL或LY2940025μg/mL干预能够提高Ishikawa细胞增殖抑制率和凋亡率;经大蒜素25、50μg/mL或LY2940025μg/mL干预能够下调p-PI3K、p-AKT、Bcl-2表达并上调Cleaved Caspase-3、Bax表达,提高Bax/Bcl-2比值,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与LY294002组比较,经大蒜素50μg/mL干预能够提高Ishikawa细胞增殖抑制率和凋亡率,下调p-PI3K、p-AKT表达并上调Cleaved Caspase-3、Bax表达,提高Bax/Bcl-2比值,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:大蒜素能够诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化而使其下游促凋亡蛋白表达上调有关.

摘要： 目的 研究罗哌卡因对子宫内膜癌生长阻滞和氧化损伤的影响.方法 选择子宫内膜癌H EC-1B和Ishikawa细胞进行研究.采用CCK-8法检测HEC-1B和Ishikawa细胞活性,最终选择1 mM的罗哌卡因处理HEC-1B和Ishikaw a细胞.克隆形成试验,流式细胞术,T ransw ell试验和微管形成试验分别检测细胞增殖,凋亡,侵袭及微管形成结节数;采用Western Blot检测E-cadherin、Vimentin和VEGF蛋白表达量.试剂盒检测HEC-1B和Ishikawa细胞中ROS、8-OHdG、ATP和线粒体超氧化物的表达量.结果 罗哌卡因能抑制HEC-1B和Ishikawa细胞增殖,侵袭及微管形成,并促进细胞凋亡.同时罗哌卡因能抑制Vimentin和VEGF蛋白的表达量,促进E-cadherin蛋白的表达量.另外,HEC-1B和Ishikawa细胞中ROS、8-OHdG和线粒体超氧化物的表达水平显著增加,ATP的表达水平显著降低.结论 罗哌卡因抑制H EC-1B和Ishikaw a细胞增殖,侵袭及微管形成,并促进细胞凋亡和氧化损伤.

摘要： 目的 探讨miR-21拮抗剂联合左炔诺孕酮(LNG)对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡的影响.方法 采用流式细胞仪检测在不同浓度、不同作用时间Ishikawa细胞的凋亡率,确定左炔诺酮最佳作用时间和浓度;将体外培养的Ishikawa细胞分为:Ishikawa组(Control组);Ishikawa+LNG处理组(LNG组);Ishikawa+LNG+miR-21拮抗剂处理组(LNG+miR-21组);Ishikawa+LNG+miR-21无关序列处理组(LNG+NC组),采用流式细胞法、细胞计数法(CCK-8)、Transwell实验及划痕实验检测各组Ishikawa细胞的凋亡、增殖、侵袭及迁移能力;采用Western blot检测各组Ishikawa细胞中PTEN、AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K蛋白表达水平.结果 不同剂量左炔诺孕酮(LNG)对子宫内膜癌Ishikawa细胞作用24 h后,细胞凋亡率随着浓度增加而升高(P均<0.05),尤其100μmol·L-1浓度存活率最低;100μmol·L-1的LNG作用下,转染miR-21拮抗剂/转染miR-21无关序列,发现子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移、侵袭能力及活性均降低(P均<0.05),同时使PTEN、AKT、PI3K等蛋白表达升高,使p-AKT,p-PI3K蛋白表达降低(P均<0.05).结论 miR-21拮抗剂联合左炔诺孕酮可以促进子宫内膜癌细胞Ishikawa凋亡,抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖.

摘要： 目的:探索大蒜素对人子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭和迁移的抑制作用及其调控机制.方法:取对数生长期人子宫内膜癌Ishikawa细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO),大蒜素低、中、高剂量组(12.5、25、50μg/ml)和顺铂组(40μg/ml).药物干预48h后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,PI染色流式细胞术分析细胞周期分布,Transwell小室法、划痕实验检测细胞侵袭能力和迁移能力,Westernblot法检测MMP-2、MMP-9、E-cadherin、PI3K、p-Akt蛋白表达.结果:经大蒜素中、高剂量或顺铂干预能够明显提高Ishikawa细胞增殖抑制率,提高处于G0/G1期Ishika-wa细胞比例,降低Ishikawa细胞侵袭能力和迁移能力,下调MMP-2、MMP-9、E-cadherin、PI3K、p-Akt蛋白表达量,较空白对照组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:大蒜素对人子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭和迁移具有明显抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期进程而抑制细胞增殖,降低MMP-2、MMP-9、E-cadherin蛋白表达以及抑制PI3K/Akt通路活性有关.

摘要： 目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)C00473在子宫内膜癌组织中的表达,及其通过调控微小RNA 15b(miR-15b)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)增殖能力的影响.方法 qRT-PCR检测20例子宫内膜癌组织(研究组)与20例正常子宫内膜组织(正常组)中lncRNA-C00473的表达情况.在Ishikawa细胞中转染过表达质粒(pcDNA3.1-C00473)、siRNA-C00473以及空质粒(pcDNA3.1),分别为过表达组、抑制组及对照组(NC组).CCK8法检测各组Ishikawa细胞增殖情况.qRT-PCR、western-blot检测各组中lncRNA-C00473、miR-15b及其靶基因细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达情况.结果 与正常组相比,研究组lncRNA-C00473的表达增高(P＜0.05).qRT-PCR显示Ishikawa细胞中lncRNA-C00473过表达与抑制效果显著(P＜0.05);与NC组相比,过表达组细胞增殖能力升高,抑制组细胞增殖力降低,差异有统计学意义(均P＜0.05);过表达组miR-15b水平低于抑制组,cyclin D1在mRNA和蛋白水平均高于抑制组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 lncRNA-C00473与子宫内膜癌相关,其可能通过miR-15b/cyclin D1途径影响子宫内膜癌细胞增殖能力.

摘要： 本发明公开了一种连续制备Ishikawa氟化剂的方法及反应装置，将二氯甲烷和二乙胺经喷射混合器混合后通过冷却器冷却，再通过喷射混合器与六氟丙烯混合，然后进入静态混合器充分反应，再经过冷却器，迅速降温，整个过程在几秒中迅速完成，有效地解决了反应时间长、副反应多等问题。反应装置包括按依次设置的一级喷射混合器、一级冷却器、二级喷射混合器、静态混合器和二级冷却器。反应装置，结构简单，使用方便。

摘要： 本发明公开了一种连续制备Ishikawa氟化剂的方法及反应装置，将二氯甲烷和二乙胺经喷射混合器混合后通过冷却器冷却，再通过喷射混合器与六氟丙烯混合，然后进入静态混合器充分反应，再经过冷却器，迅速降温，整个过程在几秒中迅速完成，有效地解决了反应时间长、副反应多等问题。反应装置包括按依次设置的一级喷射混合器、一级冷却器、二级喷射混合器、静态混合器和二级冷却器。反应装置，结构简单，使用方便。

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： 提供能保存细胞的组合物。本发明的组合物包含微小气泡。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。

摘要： 提供一种细胞的培养方法，在细胞培养器内向细胞导入因子，并在与上述细胞培养器相同的细胞培养器内培养导入了上述因子的细胞。另外，提供一种单核细胞的回收方法，其包括：对血液进行处理，制作至少部分地除去了红细胞而得到的处理血液；对处理血液进行稀释；使稀释后的处理血液中所含的单核细胞沉降；除去稀释后的处理血液的上清液；以及回收单核细胞。

摘要： 本申请提供了一种制备NKT细胞刺激性树突细胞的方法，该方法包括：将单个核细胞置于培养容器内并通过保持该培养容器静置而使得所述单个核细胞中的一些沉降于所述容器的底表面上的步骤；将除已沉降于所述培养容器的底表面上的细胞以外的悬浮细胞去除的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使已沉降于所述底表面上的细胞中的单核细胞分化为未成熟树突细胞的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使所述未成熟树突细胞成熟；和通过向所述培养容器内添加α‑半乳糖神经酰胺而将成熟树突细胞诱导为NKT细胞刺激性树突细胞的步骤。

摘要： 含有细胞细胞外基质的制造方法包括：在具有前端开口部的移液管的内部准备含有(i)细胞外基质前体以及(ii)细胞或者细胞团的细胞外基质溶液；排出上述细胞外基质溶液，在上述移液管的前端开口部形成上述细胞外基质溶液的液滴；使上述移液管的前端开口部接近细胞培养容器的培养面，按照使上述移液管的前端开口部不与上述培养面接触的方式将上述液滴载置于上述培养面上；使上述移液管的前端开口部从上述培养面远离，将上述液滴与上述移液管的前端开口部分离；以及使上述细胞外基质溶液凝胶化，形成含有细胞细胞外基质。

摘要： 本发明提供具备适宜的亲水性和强度，细胞接种后的固定性较高，可高效进行细胞增殖的细胞培养用支架材料。本发明的细胞培养用支架材料为含有合成树脂的细胞培养用支架材料，其中，所述合成树脂的氮含量为0.1质量％以上10质量％以下。

摘要： 本发明公开一种以前所未有的效率及功能性从人类iPSC诱导神经祖细胞、寡树突细胞祖细胞、寡树突细胞的新颖方法。本发明的核心是循着多能细胞到外胚层、神经外胚层到NPC到OPC到寡树突细胞路径的多个关键分化决定点处以早先未知的方式使用经实验发现的转录因子。