橡胶草糖转运蛋白TkSWEET3基因的克隆和功能初步分析

摘要

为了对橡胶草中SWEET蛋白功能进行初步分析,本研究根据橡胶草基因组和转录组数据克隆了橡胶草SWEET基因(TkSWEET3),随后利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测了TkSWEET3的组织表达特异性,通过烟草叶片瞬时表达法对TkSWEET3蛋白进行亚细胞定位,利用酵母异源表达系统检测TkSWEET3的糖转运活性。结果表明:TkSWEET3具有明显的SWEET蛋白结构域,包含两个MtN3/saliva结构域和保守基序,具有6个跨膜螺旋结构,与AtSWEET3、OsSWEET3a和OsSWEET3b具有较近的亲缘关系;TkSWEET3基因在叶、花梗、花和根中均有表达,在胶乳中不表达,其中在花中表达量最高;TkSWEET3蛋白定位在细胞膜,能够转运葡萄糖和半乳糖。本研究结果为探究TkSWEET3基因在橡胶草生长发育过程中的糖分配作用机理提供了依据。