黄瓜CsRAX2的克隆与表达分析及原核表达蛋白诱导

摘要

作为最大的转录因子家族，MYB转录因子广泛参与植物的生长发育以及对胁迫的响应与耐受。CsRAX2是黄瓜MYB转录因子家族成员之一，本研究通过同源克隆法克隆了CsRAX2全长，分析了该转录因子基因的生物信息和表达特征，在原核表达系统中诱导并纯化该蛋白。结果表明，CsRAX2全长939 bp，编码321个氨基酸，定位在3号染色体。CsRAX2蛋白定位在细胞核，与其他物种MYB的进化关系很近，是一个典型的R2R3-MYB转录因子。CsRAX2表达具有组织特异性，且低温处理显著诱导采后黄瓜CsRAX2表达，表明其可能在采后黄瓜低温反应调控中发挥作用。启动子元件分析显示，该基因启动子中含有多个环境和激素响应元件，表明非生物胁迫可能通过激素信号调控CsRAX2表达。原核表达研究表明，培养温度影响原核表达蛋白的诱导效果，降低细菌培养温度能提高上清液中融合表达蛋白产量。本研究结果为进一步研究黄瓜CsRAX2基因的生物学功能及黄瓜耐冷性机理提供了帮助。