云南省大理市黄胸鼠恙虫病东方体的分离、鉴定及56kDa型特异性抗原基因特征的研究

摘要

目的 从云南省大理市啮齿动物中分离和鉴定恙虫病东方体（Orientia tsutsugamsushi,Ot），并对分离到的Ot 56 kDa型特异性抗原（56 kDa TSA）基因全长进行扩增分析。方法 2020年8月-2021年8月采用夹夜法，在大理市4个乡（镇）采集啮齿动物样本，巢氏PCR扩增Ot保守基因，阳性样品采用小鼠腹腔接种法分离Ot。分离到的Ot用吉姆萨染色观察和间接免疫荧光试验进行鉴定，设计引物扩增Ot的56 kDa TSA全长，用MEGAⅩ、DNAStar 7.1、SeqMan等生物信息学软件进行同源性与遗传进化分析。结果 共捕获啮齿动物5属6种76只，从1只黄胸鼠肝、脾组织研磨液中扩增出了Ot序列，阳性率为2.38%（1/42）。分离和鉴定了1株Ot，命名为DALIV8。该分离株56 kDa TSA基因全长1 566 bp，编码521个氨基酸（GenBank:OM914742）。DALIV8株56 kDa TSA基因在核苷酸水平与Kawasaki、Boryong、Karp、Kato、TA763基因型相似性为82.30%～98.85%，在氨基酸水平相似性为74.04%～98.28%。该Ot分离株为TA763基因型。结论 云南省大理市黄胸鼠Ot分离株DALIV8，经对其56 kDa TSA基因的分子鉴定，确定为云南省首次分离获得Ot TA763基因型。