外源性P-MSCs移植对SAP大鼠小肠屏障功能的保护作用

摘要

目的：建立重症急性胰腺炎（SAP）大鼠模型，并分析胎盘间充质干细胞（P-MSCs）对大鼠小肠屏障功能的保护作用。方法：挑选健康的SPF级雄性SD大鼠18只，以浓度为4%的牛磺胆酸钠经胰管注射建立SAP大鼠模型。在注射诱导6 h后，应用随机数字分组法将SAP大鼠分为两组，各9只。一组设为SAP组，经大鼠尾静脉注射磷酸缓冲盐溶液，另一组设为SAP+P-MSCs组，经尾静脉注射P-MSCs。术后24 h，将两组大鼠麻醉处死后，观察大鼠肠道中P-MSCs的分布，胰脏和肠道的损伤程度和细菌对肠系膜淋巴结的侵入；比较两组大鼠的白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、D-乳酸、内毒素、C-反应蛋白（CRP）等因子水平；并检查两组大鼠小肠角化细胞生长因子（KGF）、闭锁连接蛋白-1（ZO-1）和细胞膜闭合蛋白（occludin）的表达，重点探讨胎盘间充质干细胞对SAP大鼠小肠屏障功能的保护作用。结果：大鼠成功诱导出现SAP症状。光镜和透射电镜下两组大鼠小肠结构变化清晰可见，SAP组大鼠的肠黏膜严重受损，中性粒细胞浸润，肠腔出血，但SAP+P-MSCs组大鼠肠道损伤明显减轻，炎症浸润及微绒毛脱落明显改善。两组实验检测指标比较，SAP组大鼠血清与小肠组织中均检测到促炎症因子，TNF-α、IL-1β、CRP水平明显增高，小肠KGF表达下调，而SAP+P-MSCs组大鼠的全身及小肠炎症因子显著减少，局部KGF表达上调，与SAP组比较有显著差异（P ＜0.05）。与SAP组比较，SAP+P-MSCs组大鼠的血清中D-乳酸与内毒素明显减少，ZO-1和Occludin表达显著提高，且SAP+P-MSCs组大鼠胰腺与小肠淋巴结中细菌含量也明显减少（P ＜0.05）。结论：SAP大鼠注射胎盘间充质干细胞后，可通过加强动物小肠上皮层的屏障功能，起到抑制大鼠炎症反应，降低肠道损伤，改善大鼠胰腺炎病变的作用。