巴西苏木素对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制作用及其机制

摘要

目的探究巴西苏木素对金黄色葡萄球菌生物膜的影响、抑制生物膜的机制。方法收集耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)40株,刚果红平板法和96孔板结晶紫染色法鉴定其产膜能力;采用二倍稀释法测定药物对强产膜菌最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);绘制生长曲线观察药物对生物膜生长的影响;油镜下观察药物对生物膜生长的影响;观察在药物处理后的生物膜内存活菌的数量反映对生物膜的作用效果;紫外分光光度计检测DNA及RNA等大分子物质的外渗水平;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定对可溶性蛋白的影响;检测溶血环大小反映对分泌α-溶血素的影响。结果筛选出19株生物膜阳性菌,其中强产膜菌9株、弱产膜菌10株;巴西苏木素对强产膜菌的MIC为64μg/ml,MBC为128μg/ml;生长曲线提示对强产膜菌的抑制效果与药物浓度呈正相关;镜下观察到药物浓度越高,菌体数量越少、聚集越松散;药物浓度增加,生物膜内的存活菌量减少;巴西苏木素对强产膜菌的DNA、RNA的外渗随药物浓度增加,外渗量增大;SDS-PAGE结果表明药物浓度增加,对强产膜株可溶性蛋白形成的抑制作用增强;药物浓度增加,溶血环直径减小。结论巴西苏木素对强产膜菌生物膜具有良好的抑制作用且具有浓度依赖性,可能通过减少其可溶性蛋白的形成、破坏生物膜、减少生物膜胞外DNA和RNA、减少溶血素来发挥作用。