血管内皮生长因子激活钙调神经磷酸酶促进内皮祖细胞增殖

摘要

背景血管内皮生长因子(VEGF)在内皮祖细胞(EPC)生物活性的调控中涉及多条信号通路,但是否通过调控钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路而影响EPC活性尚不清楚。目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在血管内皮生长因子(VEGF)调节EPC增殖活性中的作用。方法采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,贴壁培养获得EPC,分四组:对照组;VEGF组(VEGF50μg/L干预时间48h);环孢素A组(CsA10mg/L干预48h);环孢素A+VEGF组(CsA10mg/L干预1h,再予VEGF50μg/L干预时间48h)。比色法测定CaN活性及EPC增殖能力;TUNEL染色检测EPC凋亡;逆转录聚合酶链法检测bcl2和bax基因表达。结果VEGF刺激明显增强CaN活性(与对照组比较增加73%,P<0.01),促进EPC增殖(与对照组比较增加89%,P<0.01),增强bcl2基因表达(与对照组比较增加40%,P<0.05)。CsA预处理明显抑制VEGF的上述作用[CsA+VEGF组与VEGF组比较,CaN活性减弱60%(P<0.01),增殖能力减弱78%(P<0.01),bcl2基因表达减弱82%(P<0.01)],并增加细胞凋亡(凋亡率:CsA组:23.7%比对照组:3.3%,P<0.01)。VEGF和CsA干预对bax基因表达无明显影响。结论VEGF可通过激活CaN而促进EPC增殖活性。