GLi1通过调控自噬参与脂多糖诱导的脓毒血症体外模型

摘要

目的探讨GLi1是否通过调控自噬参与脂多糖诱导的脓毒血症体外模型。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2细胞系,LPS处理浓度梯度为0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml,24 h后CCK8测细胞活性,并收集蛋白;时间梯度为40μg/ml的LPS处理细胞0 h、6 h、12 h、24 h后CCK8测细胞活性,收集蛋白,进行WB检测相关蛋白表达。用10μmol/L的GLi1抑制剂GANT61,以及自噬抑制剂3-MA、CQ分别联合40μg/ml的LPS处理细胞24 h后,CCK8测细胞活性,收集蛋白,进行WB检测相关蛋白表达,并进行相关凋亡检测。结果HK-2细胞活性随LPS浓度升高而降低,并呈现时间依赖性;同时GLi1、LC3B、P62蛋白表达也均随LPS浓度升高呈递增趋势。自噬抑制剂3-MA、CQ抑制自噬水平,并缓解了LPS诱导的细胞凋亡;GANT61处理抑制了GLi1的表达,同时降低了自噬水平,显著提高了LPS处理后HK-2细胞活性、减少凋亡。结论脂多糖LPS能够诱导HK-2细胞凋亡,GLi1蛋白表达升高,并激活自噬;而抑制自噬或抑制GLi1的表达能够缓解LPS诱导的HK-2细胞凋亡。表明GLi1很可能通过调控自噬参与脂多糖诱导的HK-2细胞凋亡。