山杏仁蛋白诱导Caco-2人结肠癌细胞死亡

摘要

分别以水、盐、乙醇及NaOH溶液为提取剂,从山杏仁中提取蛋白,通过细胞增殖分析实验,研究山杏仁蛋白对人结肠癌细胞Caco-2生长的影响。结果表明,用有机溶剂乙醇提取的山杏仁蛋白显著抑制Caco-2细胞生长(P<0.01,其IC50值为1.018 mg/mL),而用其他提取剂提取的山杏仁蛋白并没有显示同样活性。以乙二醇、异丙醇及叔丁醇等其他有机溶剂代替乙醇提取的山杏仁蛋白,也没有显示抑制Caco-2细胞生长作用。因用乙醇提取的山杏仁蛋白具有显著抑制Caco-2细胞生长作用,称为活性山杏仁蛋白。SDS-聚丙烯凝胶电泳分析结果表明,21 ku和41 ku 2个亚基存在于活性山杏仁蛋白中。细胞活力检测结果表明,用5 mg/mL浓度活性山杏仁蛋白处理Caco-2细胞48 h后,死细胞占细胞总数的89.5%。TUNEL和Annexin V-FITC染色等细胞凋亡检测结果分别表明,活性山杏仁蛋白诱导了Caco-2细胞凋亡。