沙门菌NASBA快速检测试剂的研制

摘要

目的:建立一种快速、简便的恒温核酸扩增(NASBA)方法。方法:用AMV RTase、RNase H、,T7 RNA聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统,对dnak基因RNA序列进行扩增。结果:经50 min反应后均可扩增出预期120pb大小的产物,第1次PCR产物经转录实验后与NASBA直接扩增的产物具有较好的同源性,其灵敏度达到103CFU。结论:NASBA法对沙门菌检测具有良好的特异性和灵敏度。