交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中的应用

摘要

目的建立一种快速、敏感、特异检测恶性疟原虫的交叉引物等温扩增(cross priming amplification,CPA)技术。方法根据疟原虫的18SrRNA基因保守序列,设计CPA引物和探针。分别用CPA法、吉氏染色镜检法检测78份发热患者血样,验证CPA法特异性和灵敏性。结果采用CPA法对不同病原体核酸的检测结果显示,38份含有恶性疟原虫血样中检出37例阳性,其他病原体检测结果均为阴性,证明其特异性良好;该方法检测的灵敏度可达102拷贝/μl;与镜检法比较,其检测的灵敏度为97.37%,特异性为100%,准确度为98.72%。结论用于检测恶性疟原虫的CPA检测体系具有简便、快速、灵敏、特异的优点,可用于临床、预防和出入境口岸现场疟疾的快速检测。