肝X受体对小鼠耐受性树突状细胞的诱导作用

摘要

为研究肝X受体（LxR）对小鼠骨髓来源耐受性树突状细胞的诱导作用，取C57BL／6纯系小鼠股骨骨髓，将骨髓细胞置于含rmGM-CSF（20ng／m1）、rmIL-4（20ng／m1）、10％FBS、含／或不含LXR激动剂TP0901317（5tLmol／L）的RPMI1640培养基中生长。于第7天时检测细胞表型，指标包括：CD11c、CD80、CD86、MHCⅡ、CCR7、PD-L1等；同日加入LPS（100ng／m1）促成熟。LPS作用第3天时，检测细胞表型。以MACS分选未成熟和成熟CD11c＋细胞，以丝裂霉素C处理细胞。另取BALB／c小鼠脾脏，MACS分选CD4＋T淋巴细胞。将CD11c＋细胞与CD4＋T细胞混合培养，CCK-8法检测T细胞增殖情况。ELISA法检测细胞培养上清中IL-10水平。研究发现，TP0901317处理组：培养第7天时，CD11c＋细胞约为70．2％；CD80、CD86和MHCⅡ在CD11C＋细胞上为中低表达，表达水平在40．2％-50％；CD11c＋CCR7＋细胞约占78％；CD11c＋PD-L1＋细胞约占90％。以LPS处理促成熟第3天时，CD11c＋细胞约为85％；cD80、CD86和MHCⅡ在CD11c＋细胞上的表达水平没有明显差异；CD11c＋CCR7＋细胞约占86％；CD11c＋PD-L1细胞约占99％。混合淋巴细胞反应显示，TP0901317处理组：成熟CD11c＋细胞与未成熟细胞一样，均没有刺激CD4＋T细胞增殖的能力。而在dTP0901317未处理组：成熟CD11c＋细胞具有很强的刺激CD4＋T细胞增殖的能力。ELISA检测结果显示，与TP0901317未处理组比较，TP0901317处理组CD11c＋细胞能够产生更高水平的IL-10，具有显著意义（Pd0．05）。故而可以认为LXR活化能够诱导小鼠骨髓细胞向耐受性树突状细胞分化。