细胞色素b_5 Phe58在稳定蛋白质结构中的作用

摘要

为了解细胞色素b5血红素疏水袋中芳香性氨基酸残基和卟啉环之间π-π电子云堆积对蛋白质结构和性质的影响,用蛋白质工程的定点突变技术,分别以Tyr和Trp取代Phe58残基.用UV-vis和荧光光谱研究了F58Y,F58w突变体蛋白盐酸胍诱导的去折叠过程;研究了突变体蛋白与脱辅基肌红蛋白血红素转移反应的动力学.结果表明,用不同的芳香性氨基酸取代Phe58残基,减弱了血红素辅基与蛋白质肽链之间的结合,导致蛋白质的热变性中点温度Tm和盐酸胍变性中点浓度cm下降、血红素转移反应速率增加以及氧化还原电位移动.