低频超声对表皮葡萄球菌生物膜免疫逃逸的作用研究

摘要

目的探讨低频超声干预表皮葡萄球菌生物膜(Biofilm,BF)后的变化及中性粒细胞对BF杀菌效应的改变。方法建立表皮葡萄球菌BF体外模型,采用500mW/cm^2及800mW/cm^2声强的低频脉冲超声进行干预,平板计数及结晶紫实验分别检测不同干预下BF活菌数量及生物总量的改变,将不同声强干预后的BF与兔血分离中性粒细胞体外孵育1小时,采用革兰染色法、Transwell迁移实验、流式细胞术分别检测中性粒细胞吞噬、趋化及呼吸爆发功能。结果超声干预后表皮葡萄球菌BF活菌总数与干预前差异无统计学意义;结晶紫半定量实验显示低频超声干预下的BF结构变得疏松,且BF生物总量较阴性对照组(1.57±0.11)降低(P<0.05);应用800mW/cm^2比500mW/cm^2生物总量下降更多(1.06±0.09vs.1.34±0.08,P<0.05);与阴性对照比较,500mW/cm^2、800mW/cm^2干预组中性粒细胞对BF的吞噬功能及趋化作用均增强(P<0.05);阴性对照、500mW/cm^2及800mW/cm^2干预组中性粒细胞呼吸爆发平均荧光强度为(568±53)、(637±74)和(718±59),提示超声干预效应随着声强增加而增强(P<0.05)。结论低频超声干预表皮葡萄球菌BF后BF结构变得疏松、生物总量下降,中性粒细胞对干预后BF细菌的吞噬、趋化及呼吸爆发增强。