染料木黄酮对HepG2细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调控作用

摘要

目的探讨染料木黄酮(Gen)对HepG2人肝癌细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调节作用。方法体外培养HepG2细胞,将HepG2细胞在含有0、0.01、0.10、1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen的培养液内分别培养24、48、72 h后,用MTT法检测细胞增殖活性。用分别含0、0.01、1.00、10.00、50.00μmol/L Gen的完全培养液培养HepG2细胞24 h,收集细胞,分别进行细胞内总胆固醇(TC)含量检测、实时荧光定量PCR检测细胞低密度脂蛋白受体(ldlr)、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(hmgcr)基因的mRNA表达和蛋白印迹法检测核转录因子SREBP-2的表达。结果 0.01、0.10、1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen分别作用于HepG2细胞24 h,0.01、0.10、1.00μmol/L Gen组细胞增殖率高于溶剂对照组(均P<0.05);作用48、72 h,1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen组细胞增殖率均低于溶剂对照组(均P<0.05)。1.00、10.00、50.00μmol/L Gen与HepG2细胞共同孵育24 h,HepG2细胞内TC水平分别为(1.81±0.15)、(2.29±0.17)、(2.88±0.08)mmol/L,均高于对照组[(1.44±0.17)mmol/L],且随着Gen浓度升高,呈增加趋势(R2=0.48,P<0.01);各Gen实验组的hmgcr和ldlr基因的mRNA表达水平随着Gen浓度升高而升高(R2分别为0.53、0.79,均P<0.01)。1.00、10.00、50.00μmol/L Gen组蛋白表达灰度值均高于对照组(均P<0.01)。结论染料木黄酮能够调节细胞内胆固醇的代谢,其作用机制可能与调控SREBP-2通路有关。