脾阴虚证脾失健运大鼠回肠组织中相关蛋白表达差异及其调控机制的实验研究

摘要

目的:探讨脾阴虚证脾失健运状态下,大鼠回肠组织中相关差异蛋白的表达及其调控机制。方法:根据分层随机原则,将36只SPF级健康Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分成健康对照组、脾阴虚证模型组、中药反证组共3组,每组各12只。采用经典复合因素法塑造脾阴虚证脾失健运大鼠模型。行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)法,分别对课题组前期蛋白组学鉴定出的过氧化氢酶(Catalase,CAT)、顺乌头酸水合酶(Aconitate hydratase,ACO2)、钙联结蛋白(Calnexin,Canx)、Papss 2(Papss 2 69KD protein)、热休克蛋白90(heat shock protein 90KD,HSP 90)5个特异性表达蛋白进行检测。结果:(1)半定量分析比较各组大鼠回肠组织差异表达蛋白mRNA表达水平发现,与健康对照组比较,脾阴虚模型组回肠组织中CAT、Canx、ACO2及Papss 2蛋白的mRNA表达均显著上升(P0.05);(2)半定量分析比较各组大鼠回肠组织差异表达蛋白表达水平发现,与健康对照组比较,脾阴虚模型组回肠组织中CAT、Canx、ACO2及Papss 2蛋白含量均显著上升(P0.05)。结论:脾阴虚脾失健运状态下,大鼠回肠组织中可能存在以线粒体损伤为基础的细胞膜过氧化损伤、Ca2+稳态失衡、类乙醇毒害、过度硫酸化、神经元损伤及能量和遗传物质变化等一系列病理改变。