魔芋(Amorphophallus spp.)四种组织器官RNA提取方法的比较

摘要

由于魔芋植株各部位富含多糖,较难获得高质量的RNA。为了筛选出魔芋各组织器官总RNA提取最适合的方法,本研究采用Trizol法、异硫氰酸胍法、改良CTAB法、RNAprep Pure Plant Kit和Plant RNA Kit五种方法分别对花魔芋叶片、茎杆、根和球茎四种组织部位的总RNA进行了提取,并用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对RNA质量进行综合评价。结果表明:用Trizol法和异硫氰酸胍法提取魔芋各器官的RNA效果较差,杂质含量较高,降解严重;采用RNAprep Pure Plant Kit和Plant RNA Kit两种商业试剂盒仅提取出魔芋叶片的RNA,茎秆、根、球茎三种组织器官未能提取质量完整的RNA,所提取的RNA效果不稳定且浓度较低。改良CTAB法提取的魔芋四种组织器官RNA均能得到完整、清晰的RNA条带,且四个器官的OD260/OD280均在1.8~2.0之间,采用改良CTAB法提取魔芋各组织器官总RNA较为理想。本研究为不同器官来源魔芋植株样品的RNA提取方法提供了科学依据。