乙型脑炎病毒NS1蛋白原核表达及其免疫原性分析

摘要

目的采用大肠杆菌系统表达乙脑病毒NS1蛋白,并对表达产物进行免疫原性分析。方法将乙脑病毒NS1基因克隆入pET30a载体中,表达产物经Ni+亲和层析纯化后行SDS-PAGE和Western blot分析;并将纯化产物免疫新西兰大白兔,获得的免疫血清作间接ELISA及免疫荧光检测。结果重组JEV NS1蛋白获得表达并纯化成功;Western blot结果显示纯化蛋白能与JEV免疫的鼠多克隆腹水反应;兔免疫血清的间接ELISA结果显示血清效价达到1∶51 200以上;免疫荧光结果显示血清作1∶50、1∶100、1∶200稀释时,JEV感染的BHK细胞均显示荧光。结论重组NS1蛋白能在大肠杆菌系统中获得表达;纯化产物具有免疫原性,为进一步研究NS1蛋白的生物学特性及乙脑病毒的诊断试剂提供参考依据。