柚皮苷对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤影响

摘要

目的探讨柚皮苷对高糖引起的大鼠H9c2心肌细胞损伤作用影响及机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,用35 mmol/L葡萄糖处理建立细胞损伤模型。将细胞随机分为5组,对照组(不加任何干预)、模型组(35 mmol/L葡萄糖培养48 h)、柚皮苷低、中、高剂量组(5、10、20 μmol/L柚皮苷预先孵育4 h,再用35 mmol/L葡萄糖培养48 h。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞内质网应激(ERS)标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,caspase 12)及细胞炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、真核细胞转录因子(nuclear factor kappa-B,NF-κB)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组H9c2细胞存活率[(70.36 ±6.31)%]明显下降(P < 0.01),凋亡率[(41.25 ±7.44)%]升高(P < 0.05),细胞中IL-6、NF-κB、GRP78、CHOP和Caspase12蛋白表达水平[分别为(0.34 ±0.03)、(1.04 ±0.10)、(0.93 ±0.65)、(0.52 ±0.02)、(0.39 ±0.02)]均明显升高(P < 0.01);与模型组比较,20 μmol/L柚皮苷组H9c2细胞存活率[(92.33 ±5.64)%]明显提高、细胞凋亡率[(25.0 ±4.82)%]明显减少(P < 0.05),H9c2细胞内GRP78、CHOP、Caspase12表达水平[分别为(0.57 ±0.04)、(0.31 ±0.04)、(0.23 ±0.02)]明显降低(P < 0.05),炎性因子IL-6、NF-κB表达水平[分别为(0.23 ±0.03)、(0.76 ±0.06)]明显下调(P < 0.05);呈一定剂量效应关系。结论柚皮苷可明显减轻高糖诱导的H9c2细胞损伤、降低凋亡率,其机制可能与抑制细胞内质网应激水平和炎症因子表达有关。