光甘草定对肝癌Hep3B细胞增殖的影响

摘要

目的探讨光甘草定对肝癌细胞Hep3B增殖的影响。方法运用CCK-8检测光甘草定对肝癌Hep3B细胞活力的抑制作用;流式细胞术检测光甘草定对肝癌Hep3B细胞周期的影响;EDU细胞增殖检测方法探讨光甘草定对肝癌细胞Hep3B增殖的影响;细胞成球实验检测光甘草定对肝癌干细胞成球能力的影响;qRT-PCR法和Western blot法检测光甘草定作用后肝癌Hep3B细胞内相关基因/蛋白表达变化,探讨其作用机制。结果不同浓度光甘草定作用于Hep3B细胞后,细胞活性随着光甘草定浓度的增加而下降,24 h和48 h的IC50分别为7.4μmol·L-1和5.8μmol·L-1。PI染色显示光甘草定导致肝癌Hep3B细胞G2/M期阻滞,EDU细胞增殖实验提示光甘草定可浓度依赖性地抑制Hep3B细胞的增殖;肿瘤干细胞成球实验显示光甘草定显著减弱干细胞成球能力;qRT-PCR法检测发现光甘草定使肿瘤干细胞干性相关基因OCT4、NANOG和SOX2表达降低,同时Western blot法检测发现细胞内Hedgehog信号通路的Gli1蛋白、干性标记物Lgr5和CD133蛋白、c-Myc蛋白表达明显降低。结论光甘草定可能通过Hedgehog信号通路影响肝癌干细胞干性,进而抑制Hep3B细胞增殖。