扁柏双黄酮对肝细胞癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的研究扁柏双黄酮(HF)对肝细胞癌HepG2细胞增殖、凋亡及其作用机制的影响。方法CCK8法检测0、10、20、40、60、80、100、120μmol·L^(-1)浓度梯度的HF对肝细胞癌HepG2细胞活性的影响;平板克隆检测HF对肝细胞癌HepG2细胞增殖的影响;用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测HF对肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响;荧光探针DCFH-DA流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质印迹检测凋亡相关的蛋白表达水平。结果不同浓度的HF作用于HepG2细胞后,细胞活性随着HF浓度的增加显著降低(P <0.01),并且24 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)值分别是(59.77±2.57)μmol·L^(-1)、(48.96±4.187)μmol·L^(-1);DAPI染色显示HF可导致HepG2细胞收缩,核碎裂和染色质凝聚,出现凋亡小体;流式细胞术检测结果显示HepG2细胞早期和晚期凋亡率均随HF浓度的升高而依次升高(P <0.05);进一步的研究表明,HF处理HepG2后,显著增加细胞内ROS水平(P<0.01),并且细胞凋亡通路相关蛋白cleaved-PARP、cleaved-Caspase 3的表达也明显增加(P <0.001)。结论 HF可通过ROS/Caspase信号通路抑制HepG2细胞增殖,促进其凋亡。