槲皮素、地钱黄酮、DADS对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机理的研究

摘要

槲皮素和DADS可以抑制多种恶性肿瘤细胞的生长。地钱有报道提及其体内含有抗肿瘤以及可逆转肿瘤的成分，但未见文献报道研究结果。因以上中药有效成分毒副作用低，应用前景广泛，而倍受医药界关注，但深入系统的作用机理研究还不多见；更没有关于这些中药有效成分配伍研究的报道。
　　 本研究以HepG2细胞为研究对象，从体外细胞实验到裸鼠体内移植瘤模型实验，运用细胞生物学、分子生物学及与形态学相结合的相关技术，探讨了槲皮素、地钱黄酮、DADS药物成份及其混合物对HepG2细胞的影响，研究了可能介导的凋亡诱导作用及其机理。
　　 结果显示，槲皮素、地钱黄酮、DADS及其混合物均可诱导HepG2细胞凋亡，并与p38 MAPK的磷酸化表达增加有关。在对人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤的研究中我们也发现，DADS和地钱黄酮都可明显抑制裸鼠移植瘤增殖作用，且随浓度的增大，抑制作用增强。而在DADS和地钱黄酮分别处理后的裸鼠移植瘤组织中，检测显示凋亡细胞数也明显增加。免疫组织化学和Western-blot实验显示，细胞信息传导通路中的很多重要因子都参与了DADS和地钱黄酮诱导人肝癌HepG2细胞凋亡过程。本研究不仅发现，和在细胞水平研究时发现的一样，磷酸化P38 MAPK在DADS和地钱黄酮分别处理后的裸鼠移植瘤组织中也明显增加，而且BCL-2、Caspase-3、PCNA的表达也受到影响。本实验通过对人肝癌HepG2细胞和裸鼠移植瘤的研究，在细胞和个体水平上证实了DADS等在诱导HepG2细胞凋亡中的作用。而在凋亡的机制研究方面，本实验发现了p38 MARK蛋白的磷酸化是诱导HepG2细胞凋亡的重要途径之一，同时，通过激活的Capase-3，减少BCL-2和PCNA蛋白的表达，从而加速了细胞凋亡过程，最终达到抑制肿瘤生长的目的。本研究为这些药用成份的临床应用性研究提供了重要的实验依据。