ZHX3基因转染BMSCs及对体外成骨能力的实验研究

摘要

目的探讨转录抑制因子-锌指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因过表达对BMSCs体外成骨能力的影响。方法采用ZHX3过表达慢病毒载体转染大鼠BMSCs,同时设空载病毒转染BMSCs作为阴性对照及不做任何处理的BMSCs做空白对照。采用荧光显微镜计数细胞转染率,并采用Western blot检测ZHX3蛋白表达状况。于体外培养,经定向成骨诱导21d后采用碱性磷酸酶和茜素红染色观察各组细胞成骨能力。结果 (1)贴壁法获得的细胞具有BMSCs表型。(2)转染后,ZHX3过表达组和阴性对照组均表达绿色荧光,空白对照组不表达荧光,且ZHX3过表达组ZHX3基因表达显著高于阴性对照组。(3)ZHX3过表达、阴性对照组和空白对照组均可见碱性磷酸酶阳性表达的细胞。Kaplow评分显示前者阳性表达显著高于后两者(P<0.05)。ZHX3过表达组、阴性对照组和空白对照组均可见明显的矿化结节。前者矿化结节的数量和体积均大于后两者。结论 ZHX3基因过表达可促进BMSCs体外成骨能力。