DANCR通过激活YAP促进黑素瘤细胞侵袭并与不良预后的相关性

摘要

目的根据本院收集的黑素瘤组织标本分析长链非编码RNA DANCR(long non-coding RNA differentiation antagonizing non-protein coding RNA,LncRNA DANCR)与黑素瘤临床预后关系。阐明DANCR在黑素瘤侵袭中所扮演的角色。方法用激光捕获法获取黑素瘤组织标本以分析DANCR表达量与黑素瘤患者临床进展的关系;用A375和B16细胞株行体外实验,以慢病毒为载体在细胞中敲低DANCR。基质胶覆盖的上层小室用于Transwell模型检测细胞侵袭能力;通过Western blot实验和ELISA检测MMP2、MMP9在细胞中表达水平和细胞外分泌水平。通过Western blot实验检测p-YAP和YAP表达以明确其活性;用XMU-MP-1和Verteporfin(VP)分别在黑素瘤细胞株中激活和抑制YAP活性。结果临床数据分析可得,DANCR表达量与临床M分期和病理N分期、Breslow深度和Clark值均密切相关。在A375和B16细胞中敲低DANCR可抑制细胞侵袭,并下调MMP2、MMP9表达和细胞外分泌(P<0.05)。敲低DANCR下调p-YAP蛋白和激活YAP,而激活YAP同样可促进A375和B16细胞侵袭(P<0.05)和MMP2、MMP9表达。同样,VP(5μmol/L)处理细胞24 h抑制YAP可逆转DANCR过表达所诱导的细胞侵袭和MMP2、MMP9表达上调。结论DANCR与黑素瘤不良预后相关,敲低DANCR可通过下调YAP活性抑制细胞侵袭。