HMMR促进原发性肝癌细胞增殖且与不良预后的相关性

摘要

cqvip:目的研究透明质酸介导运动因子受体(HMMR)在原发性肝癌中的表达及对肝癌细胞增殖的影响,阐明HMMR的高表达与肝癌患者预后的相关性。方法收集GEO数据库中原发性肝癌患者(GSE121248)的临床信息及基因表达信息,生物信息学分析得到差异基因,设计针对HMMR基因的小干扰RNA载体,通过沉默HMMR基因表达验证其在肝癌细胞增殖中的影响;分析临床信息,阐明其高表达与肝癌患者预后的关系。结果临床大数据生物信息学分析发现HMMR基因在肝癌中明显高表达,免疫组化染色显示原发性肝癌组织中HMMR表达明显高于癌旁肝脏组织,免疫组化打分比较,差异有统计学意义(t=2.953,P=0.0121);利用小干扰RNA敲低HMMR的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)与实时荧光定量PCR实验验证小干扰RNA的敲低效率(沉默序列1:t=13.2,P=0.0002;沉默序列2:t=8.668,P=0.0010);平板克隆形成实验表明,低表达HMMR的肝癌细胞(HepG2)的增殖能力明显减低(沉默序列1:t=22.3,P=0.0043;沉默序列2:t=16.63,P=8×10-5);在KM-plotter数据库中分析HMMR基因表达高低对肝癌患者预后的影响,发现高表达HMMR基因的肝癌患者[总体生存率(OS):n=128、无复发生存率(RFS):n=110]OS及RFS明显差于低表达HMMR基因的肝癌患者(OS:n=236、RFS:n=206),[OS:风险比(HR)=2.29(1.62~3.24),P=1.3×10-6、RFS:HR=1.99(1.42~2.78),P=3.5×10-5],进一步分析发现,高表达HMMR的不同分期的肝癌患者的预后不尽相同,提示HMMR可以作为早期肝癌患者的预后标志物。结论HMMR在原发性肝癌患者中明显高表达,促进肝癌细胞的增殖,可以作为早期肝癌患者预后检测的潜在标志物。