以对潮霉素抗性为筛选标记的棉花遗传转化

摘要

以HPT基因作为筛选标记基因,潮霉素作为筛选剂,通过农杆菌介导法将GFP基因导入棉花细胞并得到再生植株.经过Southern杂交证实外源基因已经整合到棉花基因中,荧光显微镜可以观察到绿色荧光,说明GFP基因得到表达.研究确定了潮霉素作为棉花转化的筛选剂在农杆菌介导的转化中适用的浓度范围及筛选方法,即棉花转化中潮霉素的筛选浓度范围为2.5～10 mg@L-1,在有GFP等一些易于观察和检测的标记基因存在时,起始浓度可用较低(2.5 mg·L-1)的筛选浓度;而在没有标记基因或检测方法较复杂时,起始浓度用较高(10 mg·L-1)的筛选浓度.