抑癌基因Deleted in Liver Cancer 1在人胶质瘤细胞株中的作用及机制

摘要

目的 探讨抑癌基因DLC1表达的isoform 1及isoform 2两个亚型在人胶质瘤细胞株中的表达、功能及机制.方法 KT-PCK方法检测体外培养的胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44中DLC1 isoform 1,2的mRNA水平;10μM 5-aza-2'-de-oxycytidine(5'-AzA)或者共含有500 nM trichostatin A(TSA)处理细胞36 h,检测DLC1 isoform 1,2的表达;MTT方法检测转染DLC1 isoform 2及没有GAP活性的isoform 2突变体DLC1-K714E表达质粒对胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44增殖的影响.结果 在U87-MG细胞株中没有检测到DLC1 isoform 1;在SHG-44中检测到微量的DLC1 isoform 1,5'-AZA或者共含有TSA处理使其表达上调;DLC1 isoform 2在上述细胞株都能检测到,5'-AZA或者共含有TSA处理细胞未改变其表达水平:过表达DLC1 isoform 2及其突变体DCL1-K714E促进U87-MG和SHG-44细胞株增殖.结论 DLC1 isoform 1在胶质瘤细胞株中不表达或低表达,可能原因是由于不转录或者启动子发生甲基化.DLC1 isofonn 2有一定的表达水平.高表达的DLC1 isoform 2促进胶质瘤细胞增殖.且不依赖GAP活性.