葡聚糖修饰漆酶的制备及其催化特性和稳定性

摘要

将经NaIO4氧化处理的葡聚糖(500×103)连接在漆酶分子上以提高漆酶在酸性溶液环境中的稳定性.HPLC和SDS-PAGE分析表明葡聚糖修饰漆酶的分子量在200×103以上.荧光光谱和圆二色性光谱分析表明修饰漆酶保持了天然漆酶的三级和二级结构.酶催化反应显示修饰漆酶与天然漆酶具有类似的底物亲和性和催化活性,而其在酸性条件下的稳定性显著提高.通过葡聚糖修饰使得漆酶在pH 3,50℃下的酶活半衰期从0.07 h提高到17.1 h,在含30%(体积)乙腈,pH 3下的酶活半衰期从0.11 h提高到10.3 h.在不同pH下测定修饰漆酶在216 nm处的圆二色性光谱,结果显示偶联葡聚糖增强了漆酶分子的结构稳定性,提高了其在高温及有机溶剂存在下的催化活性.