仙茅总黄酮提取纯化工艺及其抗氧化、抗肿瘤活性

摘要

目的优化仙茅总黄酮提取纯化工艺,并评价其抗氧化、抗肿瘤活性。方法采用单因素试验结合正交试验优化提取纯化工艺,DPPH、ABTS法检测总黄酮抗氧化活性,CCK-8法检测它对Hela、HCCC、MG-63、M231细胞增殖的抑制作用,Hoechst33258法染色检测上述4种细胞凋亡形态的变化。结果最佳条件为以25倍80%乙醇在85℃下回流提取2.5 h,AB-8型树脂上样质量浓度3 mg/mL,pH 5.0,1 mL/min上样4 BV,7 BV 50%乙醇以1 mL/min体积流量进行洗脱,总黄酮得率为13.95 mg/g,纯度由9.28%提高到40.72%。纯化前后,总黄酮对DPPH、ABTS自由基均有良好的清除能力,清除前者的IC_(50)分别为(84.13±1.26)、(29.68±0.74)μg/mL,AEAC分别为(5572.46±83.00)、(15797.81±389.90)mg/100 g;清除后者的IC_(50)分别为(213.90±2.15)、(51.97±1.84)μg/mL,AEAC分别为(11989.14±121.44)、(49350.52±1727.04)mg/100 g,而且对Hela、HCCC、MG-63、M231细胞均有抑制增殖、诱导凋亡的作用,IC_(50)分别为(65.17±1.21)、(79.00±1.30)、(108.35±2.04)、(294.19±2.21)mg/L。结论该方法稳定可行,重复性好,可用于提取纯化具有良好抗氧化、抗肿瘤活性的仙茅总黄酮。