人脂肪细胞总RNA的抽提及对脂联素mRNA的扩增

摘要

目的建立一种提取脂肪组织总RNA并能够有效地进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法.方法利用Trizol试剂提取人皮下脂肪组织总RNA,用紫外分光光度法鉴定其产率及纯度,用琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR鉴定所提取的总RNA的完整性.结果采用选择性mRNA RT-PCR试剂盒特异性地扩增出脂联素(adiponectin)和β肌动蛋白(β-actin)的mRNA.结论在脂肪组织总RNA抽提中容易混入基因组DNA,而采用选择性mRNA RT-PCR只针对mRNA进行特异的扩增.