牛精子总RNA制备及mRNA线性扩增的初步研究

摘要

本研究采用改进的热TRIzol法提取了奶牛精子总RNA，RT-PCR检测了总RNA的质量，结果表明，提取的总RNA具有良好的完整性，且没有基因组DNA污染，总RNA提取过程中体细胞去除效果良好，但所制备的RNA量非常少，为进行后续的精子基因表达检测分析，采用RNA线性扩增技术对mRNA进行了两轮扩增，RNA定量分析及电泳检测结果表明，扩增后的aRNA片段大小及OD比值都较为理想并且使mRNA量显著提高，为高通量的精子RNA表达研究奠定了实验基础。