益肾清络活血方对CFA大鼠OPG/RANKL通路的影响及机制

摘要

目的探讨新安方益肾清络活血方(Yisheng-Qingluo-Huoxie prescription,YSF)对完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)诱导的类风湿关节炎大鼠中OPG/RANKL通路的影响及机制。方法取雄性SD大鼠32只,随机分为正常(Normal)组、模型(Adjuvantinduced arthritis,AIA)组、清络饮(Qing-luo-yin,QLY)组和YSF组,每组8只。除正常组外,其余均诱导为AIA大鼠,模型成功后首日灌胃给QLY和YSF中药,连续30 d。观察大鼠体质量、AI评分;HE染色法观察大鼠踝关节组织形态学变化;免疫组化法观察MMP3与p-p65的表达;酶联免疫吸附法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β、OPG、RANKL水平;Western blot法检测大鼠滑膜OPG、RANKL蛋白的表达;RT-PCR检测滑膜中OPG、RANKLmRAN的表达。结果与AIA组相比,经过YSF给药治疗后,大鼠体质量渐渐恢复正常,炎症评分降低,HE染色显示骨质保存完好,未见滑膜浸润;MMP3、p-p65出现低表达;血清中TNF-α、IL-1β、RANKL水平明显下调,OPG、OPG/RANKL水平明显上升;Western blot和RT-PCR均显示大鼠滑膜中OPG、OPG/RANKL出现高表达,而RANKL则相反。结论YSF有可能通过抑制炎症反应,降低炎症评分及血清中TNF-α、IL-1β的表达,升高OPG/RANKL的比值来调节关节骨破坏的环境,进而缓解RA病情。