补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周膜OPG、RANKL影响的实验研究

摘要

目的：采用牙周结扎联合喂食黏软食物和高糖水的方法建立大鼠牙周炎模型，灌胃牙周炎大鼠补肾活血固齿方4周，取牙体牙周局部标本，制作组织切片，切片分别行HE和免疫组织化学染色，观察牙周组织病理形态学改变及对牙周膜 OPG、RANKL水平的影响，探讨补肾活血固齿方治疗牙周炎的作用机制。
　　方法：采用随机分组方法将24只雄性SD大鼠分为3组：对照组、牙周炎组、牙周炎用药组。腹腔注射0.3％戊巴比妥钠（1ml/100g）麻醉下，剥离牙龈，直径0.2 mm的正畸不锈钢结扎丝对大鼠同侧上颌第一磨牙进行结扎，于术后当天喂食用鼠料浸泡而成的黏软食物和高糖水，建立牙周炎组和牙周炎用药组大鼠模型；对照组只施以同样的腹腔麻醉，不做牙周处理，于术后当天喂食常规鼠料和水。牙周炎造模4周后，3组随机各抽取2只大鼠，取第一磨牙牙体牙周组织标本，制作切片，行HE染色，鉴定大鼠牙周炎造模是否成功。确定造模成功后，将牙周炎组、牙周炎用药组各6只大鼠腹腔麻醉下去掉正畸不锈钢结扎丝。第2天开始牙周炎用药组灌胃补肾活血固齿方4周，牙周炎组与对照组每天灌胃同等剂量的生理盐水4周；4周后，3组大鼠切取上颌骨第一磨牙牙体牙周组织，4%中性甲醛液固定、10%EDTA脱钙、石蜡包埋、制作组织切片。HE染色观察牙周组织病理形态学改变，免疫组化染色观察 OPG和RANKL的平均光密度值的改变，数据采用 SPSS19.0统计软件进行分析处理。
　　结果：
　　1.造模4周后，牙周炎组与牙周炎用药组大鼠造模牙牙体周组织肉眼观察：牙龈红肿，质地松软，触之易出血；HE染色切片显示，牙龈上皮内炎症细胞增多，毛细血管扩张，牙龈结合上皮向根方移位，形成牙周袋，破骨细胞增多，牙槽骨有吸收。对照组肉眼观察：牙龈无明显炎症，触之不易出血；HE染色切片显示，牙周组织结构比较完整，牙龈组织无明显炎症细胞浸润，结合上皮无根方移位，破骨细胞少见，无牙槽骨吸收；
　　2.HE染色观察各组大鼠牙周组织病理形态学改变。对照组：牙周组织结构比较完整，牙龈组织无明显炎症细胞浸润，结合上皮无根方移位，破骨细胞少见，无牙槽骨吸收。牙周炎组：牙龈上皮内炎症细胞增多，毛细血管扩张，牙龈结合上皮向根方移位，形成牙周袋，破骨细胞增多，牙槽骨有吸收。牙周炎用药组：炎症细胞浸润减少，牙龈结合上皮部分恢复，牙周袋变浅，牙槽骨边缘破骨细胞数减少，有成骨细胞产生；
　　3.切片免疫组织化学染色测定RANKL平均光密度值，牙周炎组RANKL平均光密度值高于对照组和牙周炎用药组，有统计学差异，对照组与牙周炎用药组无统计学差异；4切片免疫组织化学染色测定OPG平均光密度值，牙周炎用药组OPG平均光密度值高于对照组和牙周炎组，有统计学差异，对照组与牙周炎组无统计学差异。
　　结论：
　　1.利用结扎联合喂食黏软食物和高糖水的方法成功建立了牙周炎动物模型。
　　2.补肾活血固齿方可降低牙周膜RANKL的表达。
　　3.补肾活血固齿方可增加牙周膜OPG的表达。
　　4.补肾活血固齿方可抑制旧骨吸收，促进新骨形成，对牙槽骨的重建有较好治疗效果。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1实验材料

2实验方法

结果

1 大鼠牙周炎模型的建立

2 用药4周后HE染色牙体牙周组织形态学观察

3 RANKL免疫组织化学染色测定平均光密度值并统计分析

4 OPG免疫组织化学染色测定平均光密度值并统计分析

附图

附表

讨论

1 牙周炎模型的建立

2 牙周炎的药物治疗

3 HE染色观察大鼠牙周组织病理形态学改变

4 补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周膜OPG、RANKL表达的影响

结论

参考文献

综述:OPG/RANKL/RANK信号通路在牙周炎发病中的作用机理研究概况

致谢

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