基于OPG/RANKL信号通路探讨补肾活血方改善骨质疏松大鼠动脉钙化的作用机制

摘要

目的:观察补肾活血方对骨质疏松模型大鼠胸主动脉钙化情况的影响,并基于骨保护素/核因子κB活化因子受体配体(OPG/RANKL)信号通路探讨补肾活血方改善骨质疏松大鼠动脉钙化可能的作用机制。方法:选择32只7月龄SD雄性大鼠,按随机数字表法分为对照组、假手术组、骨质疏松组和补肾活血组,每组8只。对照组不做处理,假手术组暴露睾丸但不切除,其余2组切除双侧睾丸建立骨质疏松大鼠模型。术后第16周开始干预,补肾活血组给予补肾活血方55 g/(kg·d)灌胃,其余3组给予等量生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃8周。采用双能X线吸收仪测定大鼠右后肢股骨干骨密度(BMD);采用茜素红染色法检测大鼠胸主动脉血管壁钙沉积积分光密度(IOD),观察胸主动脉钙化程度;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清骨形成标志物Ⅰ型前胶原N-端前肽(PⅠNP)、骨钙素(BGP)及骨吸收标志物Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-Ⅰ)水平;采用免疫组织化学染色检测胸主动脉OPG和RANKL蛋白表达。结果:①BMD、胸主动脉血管壁钙沉积IOD值:与对照组比较,假手术组BMD水平及胸主动脉钙化沉积IOD值无明显变化(P>0.05),骨质疏松组BMD水平明显降低,胸主动脉血管壁钙沉积IOD值明显升高(P0.05)。③胸主动脉OPG、RANKL蛋白表达水平比较:与对照组比较,骨质疏松组大鼠胸主动脉OPG表达水平显著降低,RANKL表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与骨质疏松组比较,补肾活血组大鼠胸主动脉OPG表达水平显著增加,RANKL表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血方能提高骨质疏松大鼠BMD水平,促进骨形成,还能改善其诱导的动脉钙化情况;作用机制可能与其能上调OPG表达,下调RANKL表达,调控胸主动脉中OPG/RANKL信号通路的表达有关。