基于TLR4/NF-κB/MyD88通路探讨清解化攻方抑制雨蛙素诱导重症急性胰腺炎模型大鼠炎症反应的生信分析及实验验证

摘要

目的基于TLR4/NF-κB/MyD88通路探讨清解化攻方抑制雨蛙素诱导重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠炎症反应的网络药理学分析及实验验证。方法采用网络药理学方法收集清解化攻方有效成分群和潜在靶点,构建药物-成分-靶点网络图,作用靶点通过Metascape数据库GO和KEGG富集分析,筛选SAP炎症相关的靶向通路。采用雨蛙素联合脂多糖复制SAP大鼠模型,予清解化攻方灌胃;HE染色观察胰腺组织,酶联免疫吸附实验和免疫组化验证清解化攻方对SAP大鼠的抗炎作用及其对TLR4/NF-κB/MyD88靶点通路的调控作用。结果预测并筛选得到清解化攻方有效成分105种和124个SAP关键作用靶点;KEGG富集到包含Toll样受体经典通路与NF-κB通路在内的320条不同通路。动物实验验证清解化攻方可降低SAP大鼠血清淀粉酶、血清脂肪酶活性及IL-6、TNF-α水平;HE染色观察到清解化攻方对胰腺病理组织改变的影响,并抑制炎症转导通路TLR4、NF-κB、MyD88关键蛋白的阳性表达。结论清解化攻方改善重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的作用机制之一,可能与通过下调TLR4/NF-κB/MyD88通路关键蛋白表达相关。