RhoA激酶的硫巯基化修饰在硫化氢抗大鼠神经细胞缺氧性损伤中的作用

摘要

目的 研究RhoA激酶2(ROCK2)的硫巯基化修饰在硫化氢(H2 S)抗大鼠神经细胞缺氧性损伤中的作用.方法 原代培养大鼠海马神经细胞,给予硫氢化钠(NaHS)和硫巯基化抑制剂二硫苏糖醇DTT预处理,构建细胞缺氧复氧模型.检测细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)和神经特异性烯醇化酶(NSE)活性以及细胞凋亡.纯化神经细胞中硫巯基化蛋白,检测ROCK2和硫巯基化修饰ROCK2(SSH-ROCK2)蛋白表达以及活性.结果 100、200μmol·L-1 NaHS明显提高缺氧复氧神经细胞的活力、降低上清中LDH和NSE活性、减少细胞凋亡,提示NaHS的神经保护作用;但是DTT可减弱NaHS对缺氧复氧神经细胞的保护作用.此外,100、200μmol·L-1 NaHS可减少海马神经细胞中ROCK2蛋白表达,并通过增加ROCK2蛋白硫巯基化修饰而降低ROCK2蛋白活性.结论 H2 S对大鼠海马神经元H/R损伤有明显的保护作用,其机制与硫巯基化修饰致ROCK2活性降低及ROCK2蛋白表达减少有关.