3-巯基丙酮酸硫转移酶产生的硫化氢在大鼠脑血管张力和脑血管内皮细胞缺氧损伤中的作用

摘要

目的 研究3 巯基丙酮酸硫转移酶(3 mercaptopyruvate sulfurtransferase,3 MST)产生的硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在 大鼠脑血管张力和血管内皮细胞缺氧损伤中的作用。方法 将大鼠脑基底动脉血管按随机数字表法分为Krebs Henseleit缓 冲液对照组、3MP组、ASP组、SIN 1组、ASP+SIN 1组、3MP+SIN 1组。通过微血管张力仪来测量大鼠脑基底动脉血管的张 力,收集张力仪浴槽中的灌注液并测定灌注液中硫化氢含量。原代培养大鼠脑血管内皮细胞,将细胞按随机数字表法分为对 照组、模型组、3MP组、ASP组、SIN 1组、3MP+SIN 1组。除对照组外,其他5组建造急性缺氧4 h模型,用药组分别给予相应的 药物预处理。然后测定缺氧损伤后内皮细胞活力,上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含 量,以及活性氧的含量。结果 3 MST底物 硫基丙酮酸二水合物(3 mercaptopyruvate,3MP)和 3 MST激动剂5 氨基 3 ( 4 吗啉基) 1, 2, 3 恶二唑鎓盐酸盐(3 morpholino sydnonimine hydrochloride,SIN 1)能 够舒张血栓素A2受体激动剂U46619预收缩的大鼠脑基底动脉,最大收缩率为(94.67± 3.99) %;与单独使用SIN 1相比,3 MST抑制剂天门冬氨酸(L aspartic acid,ASP)能 够减弱SIN 1舒张血管的作用,而3MP能增 强SIN 1的血管舒张作用。同时,3MP和SIN 1可以增加血管灌注液中的硫化氢的含量(90.09±5.36) μmol,而ASP可以减少 SIN 1增加的硫化氢。与急性缺氧组相比,3 MST抑制剂ASP能够进一步降低细胞活力,升高LDH活性;而3 MST激动剂SIN 1 和底物3MP能够改善细胞损伤,提高细胞活力,降低LDH活性(112.63±8.08) U/L,降低活性氧。结论 3 MST产生的硫化氢可 介导脑血管舒张,保护脑血管内皮细胞。