MG132诱导人血管内皮细胞凋亡及对caspase-3表达的影响

摘要

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人血管脐静脉内皮细胞(ECV-304)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3表达的影响.方法采用两个浓度(2, 5 μmol·L-1)的蛋白酶体抑制剂MG132处理ECV-304细胞;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;RT-PCR检测细胞内凋亡相关基因caspase-3 的转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase-3蛋白表达.结果对照组ECV-304细胞凋亡率低于5%,在2μmol·L-1MG132作用下,凋亡率为11.3%,MG132浓度升至5 μmol·L-1,细胞凋亡率增致44.5%,MG132诱导ECV-304细胞凋亡具有量-效关系;RT-PCR检测发现细胞内凋亡相关基因caspase-3 mRNA表达上调;免疫细胞化学检测细胞caspase-3蛋白表达水平升高.结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导血管内皮细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制UPP活性,促进caspase-3基因转录,使细胞内caspase-3增加而促进细胞凋亡.