基于抗氧化反应元件的药物筛选模型的建立

摘要

目的 建立基于抗氧化反应元件(antioxident response element,ARE)和SEAP报告基因的细胞筛选模型,用此模型对金雀异黄素、芹菜苷配基、儿茶素、茨非醇4种化合物进行活性比较,观察上述化合物拮抗过氧化氢损伤的作用,寻找具有强抗氧化活性作用的黄酮类化合物.方法 构建重组报告基因表达载体pARE-TAL-SEAP与对照载体分别转染HEK-293细胞,检测上述黄酮类化合物作用后对SEAP的活性和抗氧化作用的影响.结果 在加入25 μmol·L-1 H2O2进行氧化损伤的HEK-293细胞中,加入100 μmol·L-1的4种化合物进行比较时金雀异黄素的抗氧化作用最强,金雀异黄素诱导SEAP的最大表达水平较对照孔升高1.3倍;加入25 μmol·L-14种化合物的抗氧化作用时茨非醇的抗氧化作用最强,茨非醇诱导SEAP的最大表达水平较对照孔升高1.5倍.结论 利用此模型可以检测H2O2的氧化应激反应并可筛选到抗氧化活性强的黄酮类化合物.